病毒滅活效果實(shí)驗(yàn)要怎么做?病毒采樣管中添加了兩種類型的病毒保存溶液,一種是用于從修飾的裂解的病毒蛋白中提取核酸的滅活保存溶液,另一種是提高了病毒,其核酸和核酸的體外活性。抗原基于輸送介質(zhì)完整的非滅活保存解決方案。對(duì)于滅活的防腐液,有效滅活病毒并防止繼發(fā)感染非常重要。與非滅活型不同,加入高濃度裂解鹽的滅活病毒保存液可以有效地滅活病毒,可以有效地防止操作者繼發(fā)感染,但是它還含有Rnase抑制劑,可以保護(hù)病毒核酸,從被損壞降解,以便隨后通過(guò)NT-PCR檢測(cè),以下實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了其滅活效果。
病毒滅活效果實(shí)驗(yàn)的試驗(yàn)方法:
1、將準(zhǔn)備好的禽傳染性支氣管炎病毒QXL87菌株加入保存液中,按1(病毒原液):10(保存液)的比例,設(shè)定室溫為18-26℃保持45分鐘。用病毒液體接種SPF雞胚,并收集尿囊液。
2、根據(jù)尿囊腔接種方法,用1只收獲的尿囊液接種10日齡SPF雞胚,每個(gè)樣品分別接種10只雞胚,每只0.1mL,并置于37℃培養(yǎng)箱中持續(xù)144h,放棄24h死亡的雞胚,觀察并記錄24-144h雞胚的死亡以及接種后患病的活胚數(shù)。觀察雞胚的病變,并在收獲的尿囊液中進(jìn)行雞傳染性支氣管炎病毒的核酸檢測(cè)。請(qǐng)參考雞傳染性支氣管炎診斷技術(shù),使用RNA提取試劑盒提取RNA,并使用一步法進(jìn)行病毒檢測(cè)。
1/2/3組添加病毒(100ul)+保存溶液(900ul);第4組添加病毒(100ul)+生理鹽水(900ul);5/6/7組添加防腐液(1000ul)。其中,病毒保存溶液由3批組成。
病毒滅活效果實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果:
根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在1、2和3組中接種添加病毒的防腐液后,雞胚顯示正常生長(zhǎng);第4組接種了添加了病毒的生理鹽水,使雞胚患病。在第5、6和7組中接種防腐液,該防腐液未顯示出對(duì)雞胚生長(zhǎng)的抑制作用。它表明滅活的保存液可以滅活病毒。