病原微生物檢測,病原微生物指朊毒體、寄生蟲(原蟲、蠕蟲、醫(yī)學(xué)昆蟲)、真菌、細(xì)菌、螺旋體、支原體、立克次體、衣原體、病毒。
病原微生物檢測的血清學(xué)與免疫學(xué)檢測:
血清學(xué)檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進(jìn)行快速鑒定的技術(shù),簡化了鑒定步驟,常用的方法包括血清凝集技術(shù)、乳膠凝集實(shí)驗、熒光抗體檢測技術(shù)、協(xié)同凝集試驗、酶聯(lián)免疫測試技術(shù)等。酶聯(lián)免疫技術(shù)的應(yīng)用大大提高了血清學(xué)檢測的敏感性和特異性,不僅可檢測樣本中病原體抗原,也可檢測機(jī)體的抗體成分。幽門螺菌在我國人群感染率高達(dá)50%~80%,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染,其結(jié)果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率*,ELISA應(yīng)用于乙型肝炎病人早期血清學(xué)診斷的效果最為明顯。
臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何從這些細(xì)菌中分離出目標(biāo)菌是關(guān)鍵。免疫磁珠分離技術(shù)(IMBS)是
近年來發(fā)展起來的在微生物檢測領(lǐng)域中一種新技術(shù)。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯(lián)到磁珠微球上,通過抗原抗體反應(yīng)形成磁珠一目標(biāo)病原體復(fù)合物或磁珠一一抗一目標(biāo)病原體復(fù)合物,在外部磁場磁力的作用下,將目標(biāo)病原體分離出來。目前已經(jīng)開發(fā)出了針對各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團(tuán)菌等,廣泛應(yīng)用到各級科研和實(shí)驗室。經(jīng)IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測,檢測時間縮短至4h。IM—Bs還可以和其它檢測技術(shù)聯(lián)合來檢測病原菌,免疫磁珠分離得到的目標(biāo)菌可繼續(xù)用于分離培養(yǎng)使大腸埃希菌0157低檢測限由200cfu·g提高到2cfu·g~;IMBS結(jié)合聚合酶鏈反應(yīng)(IMBS—PCR)可對培養(yǎng)條件比較特殊的細(xì)菌如苛養(yǎng)菌、厭氧菌進(jìn)行快速檢測,肉類中的產(chǎn)毒素型產(chǎn)氣莢膜梭菌經(jīng)IMBS.PCR檢測,檢測時間縮短到10h,低檢測限可達(dá)10cfu·g~,有研究者利用IMBS結(jié)合實(shí)時熒光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功檢測出了水中的輪狀病毒和草莓的諾如病毒,檢測時間大大縮短;Leon—Velarde等利用IMB8結(jié)合酶聯(lián)檢測,大大提高了沙門菌的檢測效率。