病原微生物檢測是直接檢測病原微生物,或其抗原、代謝產(chǎn)物、核酸等。下面說說這兩種常見的檢測方法。
1、生化方法
生化方法檢測病原微生物實際上是測定微生物特異性酶。由于各種微生物所具有的酶系統(tǒng)不全相同,對許多物質(zhì)的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物產(chǎn)生的不同代謝產(chǎn)物來間接檢測該微生物內(nèi)酶的有無,從而達到檢測特定微生物的目的。如沙門氏菌能產(chǎn)生辛酯酶,這一性能是除沙門氏菌外的各屬腸桿菌科細菌所不具備的。該方法是以42甲基傘形酮辛酯(MUCAP)為底物,經(jīng)沙門氏菌的酶降解后,釋放出4MU,在紫外燈下觀察其發(fā)出的藍色熒光。該方法簡便易行,從加入底物到紫外燈下觀察到出結果僅需幾分鐘即可完成。其靈敏度和特異性分別可達95%和90%。對與H2S(+)反應的沙門氏菌該法更為敏感,靈敏度和特異性均接近100%。大腸埃希氏菌具β2葡萄糖醛酸酶,但以O157:H7為代表的腸出血性大腸埃希氏菌(EHEC)卻不具此酶,故β2葡萄糖醛酸酶陰性已成為初步篩查EHEC的重要特征。白色念珠菌具肽酶及N2已酰β2D半乳糖苷酶,分別以合適的試劑檢測,兩酶均陽性即為白色念珠菌。
2、血清免疫學方法
免疫學技術是利用特異性抗原抗體反應,觀察和研究組織細胞、特定抗原(抗體)的定性和定量技術。為了顯示和觀察這種抗原抗體反應,需要預先將某種標記物結合到抗體上,借標記物的熒光或酶的有色反應、放射性或高電子密度,在光鏡或電鏡下進行定性、定位或定量研究。各種形式的免疫分析方法如放射免疫分析(RIA)、酶免疫分析(EIA)、間接酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)、熒光免疫分析(FIA)、生物發(fā)光免疫分析(BIA)、化學發(fā)光免疫分析(CIA)等,直接檢測微生物或通過間接檢測微生物的成份及微生物代謝產(chǎn)物(如毒素)檢出微生物。各大文獻數(shù)據(jù)庫提供的數(shù)據(jù)顯示,幾乎建立了病原體的血清學檢測方法,表明該方法也成為了一種實驗室常用的成熟的檢測技術。